产品组成:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。
产品组成(2×)
0.1U Taq Polymerase/μl
500μM dNTP each
20mM Tris-HCl (pH8.3)
100mM KCl
3mM MgCl2
其它稳定剂和增强剂
质量控制:
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
使用说明:
本产品只需取适量2×Taq PCR Mix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使Mix溶液的浓度为1×即可进行反应。产品加蓝色染料;反应完成后,产物可直接电泳。
适用范围:
◆基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
◆DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板如GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增:
DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物带A,纯化后可直接用T/A载体克隆。
产品特点:
快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好,可最大限度的减少人为误差。
储存条件:
-20℃可长期保存,多次冻融不会影响活性。如需经常使用,可存放于4℃。
反应举例:
1、用2×Taq PCR Mix产品,以人基因组DNA为模板,扩增1kb的片段,反应体系为25μl。
(如反应体系不同,可按此比例中减少用量)。
Template |
<1μg |
Primer 1(10μM) |
1μl |
Primer 2(10μM) |
1μl |
2×Master Mix |
12.5μl |
ddH2O |
补至25μl |
2、 PCR反应循环的设置:
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃ 30 sec 30 cycles
72℃ 1 min
72℃ 5 min
3、结果检测:反应结束后取5μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
注意:以上举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定最佳反应条件。
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