产品介绍
RNAfollow(组织RNA保存液)是一种液体的,安全无毒的组织保存制剂,其可迅速渗入到组织内,稳定和保护细胞的RNA于原位,通过高效抑制RNase的活性而保持RNA的完整性。组织样品在RNAfollow中保存,不会引起RNA的降解,可不用立即处理样品或将样品冷冻在液氮。保存在该试剂中的样品,可在室温保存1周,或-20℃/-80℃长期保存,且反复冻融不会显著影响RNA的品质和数量。
产品特色
Ø 样品无需液氮处理和冷冻保存
Ø 即时RNase (核糖核酸酶)灭活
Ø 最大限度减少研磨和冷冻
Ø 长期保存且可反复冻融
Ø 用途广,可保存、运输和邮寄等
Ø 与大多数RNA分离操作兼容,结果更准确
操作步骤
1.需先估量加入RNAfollow中的组织重量,根据加入至少10倍体积组织的量来确定加入RNAfollow的使用量,如:组织100mg需加入 1ml RNAfollow。
2.动植物组织:切割获得组织样品,对于过大的组织需剪切成任何一边的最大厚度不超过12.5px,完全侵入到RNAfollow保存液中。
培养的细胞、细菌和真菌等:离心收集细胞,弃去上清,将细胞等用PBS清洗一次,再用少量的PBS重悬,然后加入2倍体积的RNAfollow溶液保存。
注:RNAfollow只能用于新鲜组织,在浸入RNAfollow之前不能冷冻组织。组织样品体积尽量小,对于过大组织样品要简单切碎,最大厚度不可超过12.5px。
3. 在RNAfollow中的样品组织保存时间:在37℃可保存2天;在室温(25℃)可保存一周时间;4℃可至少保存1个月;对于-20℃或-80℃长期保存,先将样本在4℃条件下过夜渗透,再移入到-20℃或-80℃长期保存。
注:RNAfollow不会溶解或破坏组织样品的结构,可反复冻融至少20次以上,不会显著影响RNA的完整性。若需长途运输,在运输过程中需确保组织完全浸入在RNAfollow中。
4.保存在RNAfollow中样品的RNA提取:RNAfollow溶液可与多数的RNA提取方法兼容,如常见的TRIzol或柱式RNA提取试剂盒。
组织:用灭菌镊子将组织从RNAfollow中取出,移入到RNA提取试剂中(如TRIzol),迅速地将其匀浆,按照新鲜组织提取RNA的方法进行RNA的提取。
细胞:从保存在RNAfollow中的细胞中提取RNA,可通过离心,去除RNAfollow溶液,再加入RNA提取试剂。或者,直接向细胞和RNAfollow混合液中加入RNA提取试剂,裂解细胞,提取RNA。
保存条件
室温保存,运输,二年有效;低温贮存可能会产生沉淀或析出晶体,需37℃完全溶解后再用。
注意事项
1. RNAfollow溶液只能保存新鲜组织样品,不能用于冷冻样品的保存本品适用于NC膜和PVDF膜,推荐使用PVDF膜,效果更佳;
2. 组织样本任何一边的最大厚度不能大于0.5 cm, 然后将组织块放入到10倍体积的RNAfollow中保存,要完全浸入到RNAfollow中。
3. 离心沉淀细胞,去除RNAfollow,需至少5000g以上的离心力。
4. 植物叶片不适合用该试剂保存,因表面的腊表皮使RNAfollow很难完全渗入。
5. 全血、血浆或血清中的RNA不可保存在RNAfollow中,因为它们蛋白含量过高,与RNAfollow混合后易形成不溶的沉淀。对于全血中白细胞的保存,要将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAfollow中。 |