产品介绍

NanoEnter®Transfection Reagent是一种采用纳米技术合成的生物可降解的高性能转染试剂，不含动物来源组分。该纳米聚合物可快速地与DNA形成稳定的复合物，通过细胞膜进入到细胞内，整个转染过程快速、高效、低毒、重复性好。

产品特色

Ø  适用于多种细胞系的转染，结果重复性好

Ø  细胞毒性低，转染复合物添加前后，不需要更换培养基

Ø  可瞬时及稳定转染

Ø  血清和抗生素耐受性高，培养基可含或不含血清和抗生素

Ø  操作简单，NanoEnter-DNA复合物孵育5min即可转染

操作步骤

以12孔板为例:

1.转染用细胞准备：转染前接种细胞于合适的容器中，培养约24h，细胞密度70%-90%为宜，确保细胞处于最佳状态

2.将1µg质粒DNA用100µl合适的稀释液（如Opti-MEM，无血清DMEM或150mM NaCl 溶液），质粒终浓度为0.01µg/µl, 轻柔混匀制备DNA稀释液。

  ★ 注意：需先稀释DNA，且质粒终浓度为0.01µg/µl，再加入NanoEnter®转染试剂，不可颠倒顺序，否则会显著降低转染效率。

  3.将 2 µl NanoEnter®Transfection Reagent直接添加至含DNA的稀释液中，轻柔混匀。

  ★ 注意：一般细胞系的NanoEnter：DNA比例为2:1或3:1 间获得较高的转染效率，研究者根  据自己的细胞系，在  NanoEnter：DNA=2:1；3:1；4:1；5:1优化，获得最高转染效率。

  4.在室温条件下孵育转染试剂NanoEnter:DNA复合物5分钟，转染复合物即可制备完成。

  ★ 注意：  NanoEnter® Transfection Reagent可与DNA分子快速形成复合物，通常5分钟孵育时间即可完成。某些情况下（如特殊细胞类型及稀释比率等），需要延长孵育时间，最长为20分钟，根据您的特殊细胞系类型及稀释比率不同来优化孵育时间。

5.取出细胞培养皿，无需弃去生长的培养基，将NanoEnter®Transfection Reagent-DNA复合物逐滴加至细胞中。

  ★ 注意： NanoEnter® Transfection Reagent对血清和抗生素耐受性高，含抗生素的完全培养基对转染效率影响不大。

  6.转染后，培养细胞18-72小时后对细胞进行鉴定或加入抗生素筛选稳定克隆。

   ★ 注意：不同细胞系对本转染试剂的敏感度不一样，如果有明显的细胞毒性等情况发生，请转染后4-6小时更换培养基。

保存条件

　　常温运输，4℃保存，有效期12月（不可冻融）